将消化好的蛋白样品三支,空白对照液三支,依次作蒸馏吸收。
加5mL热的蒸馏水至消化好的样品或空白对照液中,通过小玻杯加到反应室中,再用热蒸馏水洗涤小玻杯3次,每次用水量约3mL,洗涤液一并倒入反应室内。其余操作按标准硫酸铵的蒸馏进行。
由于消化液内硫酸钾浓度高而呈粘稠状,不易从凯氏烧瓶内倒出,必须加入热蒸馏水5 mL稀释之,如果有结晶析出,必须微热溶解,趁热加入玻杯,使其流入反应室。此外,还应当注意趁仪器洗涤尚未完全冷却时立即加入样品或空白对照液,否则消化液通过冷却的管道容易析出结晶,造成堵塞。
(三)凯氏定氮仪滴定
样品和空白蒸馏完毕后,一起进行滴定。
打开接受瓶盖,用酸式微量滴定管以0.0100mol/L的标准盐酸溶液进行滴定。待滴至瓶内溶液呈暗灰色时,用蒸馏水将锥形瓶内壁四周淋洗一次。若振摇后复现绿色,应再小心滴入标准盐酸溶液半滴,振摇观察瓶内溶液颜色变化,暗灰色在一二分钟内不变,当视为到达滴定终点。若呈粉红色,表明已超越滴定终点,可在已滴定耗用的标准盐酸溶液用量中减去0.02mL,每组样品的定氮终点颜色必须完全一致。空白对照液接受瓶内的溶液颜色不变或略有变化尚未出现绿色,可以不滴定。记录每次滴定耗用标准盐酸溶液毫升数,供计算用。
广西全自动凯氏定氮仪JTKDN-C蛋白质测定仪产品说明:
JTONE品牌定氮仪蒸馏器按凯氏定氮法而设计,主要用来检测粮食、食品、乳制品、饮料、饲料、土壤、水、药物、沉淀物和化学品等中的氨氮、蛋白质氮等含量。检测结果符合GB/T6423-94规定指标。KDN系列定氮仪蒸馏器外形美观,操作方便,采用微电脑进行过程控制,具有自动式蒸馏控制、自动加水、自动水位控制、自动停水和水压过低报警等功能。其作用是自来水(纯净水)经冷凝器、稳压器后进入蒸气发生器,产生连续稳定的蒸气,对已消化处理的样品进行蒸馏,经滴定计算出试样的蛋白质含量。
凯氏定氮仪实验精度的影响因素
凯氏定氮仪是一款自动加酸加碱加稀释液的蒸馏装置,滴定过程是需要手动完成,并通过人工计算氮含量的凯氏定氮仪器。凯氏定氮仪适用于食品、饮料、医药、农林渔业、矿山、化工等生产企业,以及高等院校、科研院所、环境监测、土肥站、农机站、质量监督检验等科研检测单位对食品、乳制品、天然橡胶、乳胶、种子、土壤、植株、饲料、矿石、污泥及化学沉淀物等样品中对蛋白质含量的智能化测定。
凯氏定氮仪采用国际广泛认可的食品蛋白质含量检测方法—凯氏定氮法。凯氏定氮仪是分析有机化合物含氮量的常用方法,其原理是首先将含氮有机物与浓硫酸共热,经一系列的分解、碳化和氧化还原反应等复杂过程,zui后有机氮转变为无机氮硫酸铵,这一过程称为有机物的消化。消化完成后,将消化液转入凯氏定氮仪反应室,加入过量的浓氢氧化钠,将NH4+转变成NH3,通过蒸馏把NH3驱入过量的硼酸溶液接受瓶内,硼酸接受氨后,形成四硼酸铵,凯氏定氮仪然后用标准盐酸滴定,直到硼酸溶液恢复原来的氢离子浓度。因此凯氏定氮法必须分三步进行,分别为:消化、蒸馏和吸收、滴定。
凯氏定氮仪可检测谷物、食品、饲料、水、土壤、淤泥、沉淀物和化学品中的氮和蛋白质,因此也被称为蛋白质测定仪。凯氏定氮仪作为测定蛋白质仪器,广泛应用于乳与乳制品中蛋白质的含量的测定。凯氏定氮仪具有高灵敏度,分析速度快,应用范围广,所需试样少,设备和操作比较简单等特点。凯氏定氮仪是目前使用zui广泛测定乳与乳制品中蛋白质的仪器。
广西全自动凯氏定氮仪JTKDN-C蛋白质测定仪概述凯氏定氮仪是依据经典(凯氏定氮)法设计的自动测氮蒸馏系统,该仪器安装、操作简单;使用安全、可靠、省时、省力;自动化程度高,适用于粮油检测、饲料分析、植物养分测试、土肥检测、医药、化工等行业的分析、教学及研究中,是操作人员的理想工具。
二、工作原理
根据凯氏定氮原理测定氮需要三个步骤,即消解、蒸馏、滴定。凯氏定氮仪可以完成蒸馏过程。当被测定样品消解完全后,上机完成下列化学反应:
(NH4)2SO4 +2NaOH 高温蒸汽 Na2SO4+2H2O+2NH3↑
反应中释放的氨气与水蒸气一起经过冷凝管冷凝后,被收集在装有硼酸吸收液(含混和指示剂)的三角瓶中,用滴定管进行滴定,根据酸滴定量,用下列公式计算含氮量及粗蛋白含量。
BQ13-QSY型凯氏定氮仪,是依据经典凯氏定氮法设计的测氮蒸馏系统,可对土壤、食品、农产品、饲料以及一些物质进行氮、蛋白质含量的测定。该仪器采用电磁阀控制系统工作过程,给化验室测定人员在进行测氮馏过程时,提供了极大的方便。改变了凯氏瓶蒸馏时的操作繁琐和不安全因素,具有使用安全、可靠;操作简单、省时、省力等特点。